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- 細胞工程
- 細胞生物學
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對大鼠乳癌細胞係 SHZ-88的 G-6-PDH、LDH、SDH 及 G-6 Pase 等酶進行細胞化學定性及半定量分析,並與(yu) 相應的正常乳腺上皮細胞同種酶活性進行比較。結果顯示,除 G-6-Pase 外,其餘(yu) 三種酶活性在 SHZ-88乳癌細胞係均較正常乳腺上皮細胞增強。這可能是 SHZ-88癌細胞碳水化合物代謝從(cong) 有氧氧化轉向無氧酵解,以適應癌細胞快速生長對核酸前體(ti) 物的需要。
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本課題在大鼠帶蒂腹壁淺動脈皮瓣(Superficial inferior epigastric artery flap, SIEA flap)模型的基礎上,深入探討慢病毒載體(ti) (Lentivirus, LV)介導外源基因增強型綠色熒光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)經動脈介入灌注轉染複合組織瓣的可行性、安全性並對其轉染條件作出評價(jia) ,並首次將抗腫
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本研究利用CRISPR/Cas9基因編輯技術,構建鈣調磷酸酶A beta (calcineurin A beta,CnAβ)基因敲除的大鼠RBL-2H3細胞株,並探討CnAβ基因對RBL-2H3細胞生長及脫顆粒的影響
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本研究以7,12—二甲基苯並蒽複製SD(sprague-Dawley)大鼠乳腺癌組織為(wei) 材料作貼壁靜置培養(yang) 現已傳(chuan) 代180餘(yu) 次,細胞生長穩定,定名為(wei) SHZ—88。 SHZ—88瘤細胞貼壁單層生長,光鏡下為(wei) 多邊形,卵圓形,少數呈梭形並有樹枝狀突起,可見瘤巨細胞及多倍體(ti) 細胞。電鏡下細胞表麵有微絨毛,核內(nei) 及胞漿內(nei) 假包涵體(ti) 易見。130代細胞懸液2.2×10~4/ml,細胞接種於(yu) 培養(yang) 瓶內(nei) ,見分裂指數第三天達高峰
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目的觀察大鼠骨髓來源間充質幹細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)對RH-35肝癌細胞侵襲能力的影響。方法密度梯度離心法分離培養(yang) 大鼠骨髓MSCs,成骨與(yu) 成脂誘導分化鑒定其分化能力。收集MSCs條件培養(yang) 基(MSCs-CM),與(yu) RH-35細胞共培養(yang) 72h,Transwell小室觀察MSCs-CM對RH-35細胞侵襲轉移能力的影響;Realtime PCR與(yu) Western blo
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合成5種核堿丙氨酸,探討其細胞毒性及機製.方法 用絲(si) 氨酸-內(nei) 酯親(qin) 核開環方法合成5種核堿丙氨酸,用MTT法檢測它們(men) 對大鼠正常肝細胞BRL-3A和大鼠肝癌細胞RH35活性的影響,流式細胞術檢測它們(men) 對上述BLR-3A和RH35細胞周期進程和凋亡的影響,用Real-fime PCR檢測它們(men) 對上述兩(liang) 種細胞增殖/凋亡相關(guan) 基因表達的影響.結果 合成了1-尿嘧啶-L-丙氨酸、1-胸腺嘧啶-L-丙氨酸、1-胞嘧啶-
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為(wei) 了研究豹蛙抗瘤酶(ONC)與(yu) 維生素C(VC)對腫瘤細胞的協同促凋亡作用,對大鼠肝癌RH-35細胞進行單藥組和聯合用藥組處理。采用磺酰羅丹明B法測定細胞增殖抑製率,Hoechst染色檢測細胞核變化。采用聯合指數和等效線圖解法評價(jia) 聯合用藥效果,流式細胞法檢測細胞的凋亡情況。試驗結果表明:ONC單藥組和VC單藥組對RH-35細胞增殖的抑製作用均顯著(P<0.01),聯合用藥組的促凋亡作用優(you) 於(yu) 單藥組(P
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目的探討參麥注射液(SMI)對RBL-2H3細胞脫顆粒的影響及其原因。方法以C48/80為(wei) 工具藥建立RBL-2H3細胞脫顆粒模型,檢測不同濃度C48/80與(yu) RBL-2H3細胞作用不同時間後細胞β-己糖苷酶、類胰蛋白酶和組胺的釋放率以及細胞活力,在細胞活力大於(yu) 80%情況下,選擇釋放程度較高的指標和條件為(wei) 優(you) 選考察指標和條件。將SMI和其溶劑(Tween-80)原液等比稀釋成不同濃度後與(yu) RBL-2H3細
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目的研究藥物致RBL-2H3細胞脫顆粒的最佳試驗條件,選用陽性反應藥物對其適用性進行考察。方法以不同密度種植細胞連續培養(yang) ,采用MTT法尋找細胞最佳狀態的時間點及種植密度;以C48/80為(wei) 工具藥物,對藥物與(yu) 細胞作用的最佳反應體(ti) 係進行比較,並考察藥物作用下RBL-2H3細胞脫顆粒的"量-時-效"變化,確定最佳反應體(ti) 係及最佳給藥量和作用時間。
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研究在Huh7細胞中原兒(er) 茶酸對肝細胞核因子(3α/3β/4α)的影響,通過熒光定量PCR和蛋白印跡的方法檢測,結果顯示原兒(er) 茶酸不僅(jin) 能抑製Huh7細胞中肝細胞核因子(3α/3β/4α)的m RNA水平,還能抑製肝細胞核因子4α的蛋白水平,綜上所述原兒(er) 茶酸能夠抑製Huh7細胞中肝細胞核因子(3α/3β/4α)的表達.1
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目的:觀察從(cong) 肝癌細胞係Huh-7中分選出的EpCAM+細胞亞(ya) 群的腫瘤幹細胞樣特性。方法:采用免疫磁珠法從(cong) Huh-7細胞中分離EpCAM+和EpCAM-細胞亞(ya) 群,比較其體(ti) 外增殖、克隆形成、分化、耐藥和體(ti) 內(nei) 成瘤能力。結果:EpCAM+細胞體(ti) 外增殖能力強於(yu) EpCAM-細胞(P<0.001);EpCAM+細胞克隆形成數高於(yu) EpCAM-細胞(P<0.001);分選後隨著培養(yang) 時間的延長,EpCAM+細胞的比率
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目的:探討核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)經過不同濃度白細胞介素-33(Interleukin-33,IL-33)影響後對人肝癌Huh-7細胞的侵襲、凋亡影響。方法:(1)體(ti) 外培養(yang) 人肝癌Huh-7細胞,將處於(yu) 對數生長期的Huh-7細胞隨機分為(wei) 5組,分別為(wei) :(1)空白對照組(37℃、5%CO_2培養(yang) 箱中培養(yang) )、(2)20ng/L組(加入IL-33,終濃度為(wei) 20ng/L)
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目的:觀察絞股藍(Gynostemma pentaphyllum GP)含藥血漿對人肝癌Huh-7細胞增殖、遷移及對轉化生長因子β_1(TGF-β_1)的影響,初步探討絞股藍影響肝癌細胞增殖、遷移的作用機製。方法:根據血漿藥理學研究原理,選健康成年SD大鼠,采用絞股藍水煎劑灌胃,以及生理鹽水灌胃的正常空白血漿對照組,用EDTA抗凝管收集絞股藍含藥血漿。對人類肝癌細胞株Huh-7進行體(ti) 外培養(yang) ,進行細
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目的 觀察低濃度二甲雙胍對肝癌(HCC)細胞株Huh-7細胞遷移、侵襲能力的影響,並探討其機製.方法 取對數生長期的Huh-7細胞,分別加入1、0 mmol/L二甲雙胍幹預(分別記為(wei) 觀察組和對照組),采用劃痕實驗評估二甲雙胍對細胞遷移能力的影響,細胞侵襲實驗評估二甲雙胍對細胞侵襲能力的影響,葡萄糖代謝芯片評估二甲雙胍對細胞PDK4 mRNA表達的影響,免疫印跡實驗分析二甲雙胍對細胞PDK4蛋白表達
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檢測肝癌細胞HepG2株線粒體(ti) 亮氨酸拉鏈EF-hand結構域(LETM1)基因突變.[方法]提取HepG2株細胞中的mRNA並合成cDNA,采用PCR方法擴增LETM1基因,連接到真核表達載體(ti) pCMV-3Myc-2A上,構建重組質粒pCMV-3Myc-LETM1,酶切,測定序列並檢測突變位點.[結果]肝癌細胞LETM1基因發生突變和氨基酸改變,突變發生於(yu) G148A(纈氨酸→異亮氨酸)、G320A(
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目的研究胰島素、胰島素原對胰島素抵抗狀態下HepG2細胞PAI1分泌的影響。方法選擇在合成PAI1方麵與(yu) 肝細胞相似的HepG2細胞,以高濃度胰島素誘導胰島素抵抗後,分別用生理濃度的胰島素、胰島素原刺激24小時,以觀察胰島素抵抗狀態下PAI1活性的變化。
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探討高糖、地塞米鬆、胰島素誘導肝細胞HepG2胰島素抵抗模型(IR-HepG2)的建立方法,檢測杏鮑菇多糖、紅棗多糖和枸杞多糖體(ti) 外改善肝細胞胰島素抵抗的作用,評估3種多糖的降糖效果.選擇不同濃度的地塞米鬆、胰島素及兩(liang) 者聯合作用,在高糖培養(yang) 條件下誘導HepG2胰島素抵抗,MTT法檢測不同誘導劑對HepG2細胞活性的影響,葡萄糖氧化酶法測定細胞葡萄糖消耗量,同時檢測去除誘導劑後,IR-HepG2細胞模
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肝癌(Hepatic carcinoma)是常見的惡性腫瘤之一,由於(yu) 發病率高、發病隱匿,晚期化療藥物毒副作用大等特點,患者的治愈率普遍偏低且愈後不佳。因此,從(cong) 天然產(chan) 物中分離提取安全、高效的活性成分,用以研發肝癌預防、治療和愈後調理的新產(chan) 品,已然成為(wei) 國內(nei) 外的研究熱點。蛹蟲草(Cordyceps militaris(L.)Link)是蟲草真菌侵染昆蟲幼蟲或昆蟲蛹而形成的子實體(ti) ,研究表明,蛹蟲草提取物(
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目的 利用高通量的高內(nei) 涵篩選(high-content screening,HCS)技術,從(cong) 天然黃酮類化合物中篩選出對大鼠生長激素腺瘤GH3細胞具有生長抑製作用的化合物並對其作用機製進行初步探討.方法 HCS技術檢測13種天然黃酮類化合物處理GH3細胞24、48 h後細胞的生長形態及增殖活力.不同濃度的黃酮類化合物處理GH3細胞24 h後經Annexin V-FITC/PI雙染,流式細胞儀(yi) 分析化合
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目的觀察一氧化氮(NO)釋放劑S-亞(ya) 硝基-N-乙酰青黴胺(SNAP)對大鼠生長激素(GH)腺瘤GH3細胞增殖、GH分泌的影響,並探討其機製。方法將細胞分為(wei) A、B、C、D組,A組常規培養(yang) ,B、C、D組分別加ghrelin、SNAP、SNAP+ghrelin培養(yang) 。分別於(yu) 培養(yang) 第0、1、2、3、4、5、6天,用MTT法檢測細胞吸光度值觀察細胞增殖情況;培養(yang) 2 h後,用ELISA法檢測GH3細胞培養(yang) 液中的G